Реагент Pyrotell-T для визначення бактеріальних ендотоксинів (кінетичний турбідиметричний метод), Associates of Cape Cod. Inc.
Pyrotell®-T – високочутливий LAL-реагент для кількісного визначення бактеріальних ендотоксинів кінетичним турбідиметричним методом відповідно до вимог USP <85>, Європейської фармакопеї 2.6.14 та Японської фармакопеї. Це ліофілізований лізат амебоцитів (LAL) Limulus polyphemus, призначений для автоматизованого визначення ендотоксинів способом реєстрації змін оптичної густини реакційної суміші під час перебігу реакції.
Pyrotell®-T використовується для аналізу води, фармацевтичних субстанцій, готових лікарських засобів, медичних виробів та інших матеріалів, що підлягають контролю на вміст бактеріальних ендотоксинів.
Принцип методу
Метод базується на активації ферментативного каскаду LAL-реагенту під впливом бактеріальних ендотоксинів. У присутності ендотоксинів відбувається послідовна активація ферментів, що спричиняє утворення нерозчинного коагуліну та збільшення каламутності реакційної суміші. Зміна оптичної густини реєструється фотометрично в режимі реального часу.
Час досягнення встановленого порогового значення обернено пропорційний концентрації ендотоксинів у зразку та використовується для побудови стандартної кривої і кількісного визначення результату.
Основні характеристики
- Метод: кінетичний турбідиметричний
- Відповідність USP <85>, EP 2.6.14 та JP
- Кількісне визначення ендотоксинів у режимі реального часу
- Висока чутливість і широкий робочий діапазон
- Температура інкубації: 37 ± 1 °C
- Автоматизований розрахунок результатів за стандартною кривою
- Формат постачання: ліофілізований реагент у наборах по 5 або 25 флаконів
Проведення тесту
Реагент відновлюють безпосередньо перед використанням одним із рекомендованих розчинів: водою для LAL-реагентів (LRW), буфером Pyrosol®, буфером Glucashield®.
Вибір розчину для відновлення залежить від типу зразка й особливостей методики. Для зразків, що можуть містити β-глюкани, рекомендується використання буфера Glucashield® для мінімізації впливу фактора G.
Після відновлення реагент додають до стандартів, контролів і дослідних зразків. Інкубація та вимірювання проводяться за температури 37 ± 1 °C з автоматичною реєстрацією змін оптичної густини і подальшим розрахунком концентрації ендотоксинів.
Умови зберігання
Невідкритий реагент зберігають за температури 2…8 °C до закінчення терміну придатності. Відновлений реагент рекомендується використовувати відповідно до інструкції виробника для забезпечення максимальної точності й відтворюваності результатів.
Комплексне рішення для LAL-тестування
Для проведення повного аналізу бактеріальних ендотоксинів рекомендується використовувати:
- Pyrotell®-T
- Контрольний стандарт ендотоксину (CSE) 0,5 нг у флаконі
- Воду для ЛАЛ-реагентів (LRW)
- Буфер Pyrosol®
- Буфер Glucashield®
- Апірогенні пробірки Pyrotubes® і 96-лункові мікропланшети
- Апірогенні наконечники
Переваги
- Відповідність міжнародним фармакопейним вимогам
- Висока точність і відтворюваність результатів
- Кількісне визначення ендотоксинів у широкому діапазоні концентрацій
- Можливість автоматизації процесу аналізу
- Сумісність із сучасними системами кінетичного турбідиметричного аналізу
- Можливість використання спеціалізованих буферів для усунення інтерференції
- Оптимальне рішення для фармацевтичних підприємств та медичних виробників